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Xanthomonas oryzae pv.oryzae LAMP可视化检测方法的建立

作  者:
王星;柴文栋;杨俊;张小芳;姬广海
单  位:
河南省舞钢市枣林镇中心小学;云南农业大学植物保护学院;河南省舞钢市质量技术检验测试中心
关键词:
水稻白叶枯病菌;环介导等温扩增;可视化检测
摘  要:
由X anthomonas oryz ae pv.oryz ae引起的水稻白叶枯病严重影响我国水稻安全生产,尤其在杂交稻上,损失高达40% ~60%,在水稻种子市场监管过程中由于缺乏快速检测手段,造成带菌种子在市场中流通.利用SYBR Green I作为荧光指示剂,建立了水稻白叶枯病菌的环介导等温扩增(LAMP)可视化快速检测方法.以水稻白叶枯病菌为对象,通过Primer Explorer V4.0软件一共设计出四条特异性的LAMP引物以及两条环引物,优化并建立了水稻白叶枯病菌的可视化快速检测方法.结果表明:在65℃恒温条件下反应1 h,LAM P检测特异性和灵敏度,加入SYBR Green I荧光染料,水稻白叶枯病菌呈现荧光绿色,对照菌株则保持不变,依然呈橙色.LAM P反应检测灵敏度DNA的浓度大小为为100 fg/μL,菌悬液为3×103 cfu/mL.应用LAMP技术检测水稻白叶枯病菌Xanthomonas oryzae pv.oryzae具有特异性强、灵敏度高、操作简单快捷的特点,可用于市场监管过程中快速检测水稻白叶枯病菌.
译  名:
Development of Visual Detection by Loop-mediated Isothermal Amplification(LAMP) Assay of Xanthomonas oryzae pv .Oryzae

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