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碳离子束诱变选育高产角鲨烯类酵母及电转化初探

作  者:
肖艳;王璐;王森;丛培虎;陆栋;冯银刚;崔球;宋晓金
单  位:
山东省科技服务发展推进中心;山东大学澳国立联合理学院;中国科学院生物燃料重点实验室/山东省合成生物学重点实验室/山东省能源研究院/中国科学院青岛生物能源与过程研究所;中国科学院近代物理研究所
关键词:
角鲨烯;类酵母;碳离子束;诱变;电转化;
摘  要:
为进一步提高角鲨烯产量,以海洋产角鲨烯类酵母(Pseudozyma sp.) SD301为出发菌株,采用碳离子(12C6+)束诱变技术选育高产角鲨烯的突变菌株,并对突变菌株的电转化条件进行优化。利用100μmol·L-1过氧化氢(H2O2)作为筛选压力,在12C6+束辐照剂量为120 Gy时,获得了比出发菌株具有更高角鲨烯产量的突变株PS120,该突变株在培养3 d后,角鲨烯产量达到1.33 g·L-1,角鲨烯质量(细胞质量)达到41.31 mg·g-1。利用绿色荧光蛋白EGFP作为表征标记,对PS120进行电转化条件优化,酶切、电泳和测序研究结果表明900 V电压条件下可成功将编码EGFP的基因转入到PS120细胞中,通过激光共聚焦显微镜进一步证实EGFP蛋白在该细胞中高水平表达。

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