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鸡传染性贫血病毒CRISPR/Cas13a检测方法的建立及初步应用

作  者:
徐晴晴;王峰;王文秀;莫玲;沈志强
单  位:
太仓广东温氏家禽有限公司;山东省院士工作站;山东省滨州畜牧兽医研究院博士后科研工作站
关键词:
鸡传染性贫血病毒;RPA;crRNA;Cas13a
摘  要:
为了快速、准确和简便地检测鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus, CIAV),本研究参照GenBank中CIAV的VP2基因设计了特异的RPA引物和用于LwCas13a反应系统的crRNA,通过优化反应条件建立了检测CIAV的CRISPR/Cas13a方法,并验证了该方法的特异性、敏感性和复合性。结果显示,该法对感染鸡的其他常见病毒的检测均为阴性,特异性良好无交叉反应;灵敏度为50 copies/μL;与PCR的检测结果有很好的符合率。本研究建立的CRISPR/Cas13a检测方法配合试纸条显色在1.5 h内可对CIAV进行快速的鉴别诊断,为该病的诊断及防控净化提供了强有力的技术支撑。

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