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果生刺盘孢Crz1基因对DMI类杀菌剂抗性、外界胁迫应答、附着胞形成和致病力的影响

作  者:
马梦婷;李河
单  位:
中南林业科技大学林学院
关键词:
油茶;果生刺盘孢;杀菌剂;致病力;胁迫响应
摘  要:
为明确钙调磷酸酶应答锌指转录因子1 (calcineurin responsive zinc finger transcription factor 1,Crz1)在果生刺盘孢Colletotrichumfructicola中的生物学功能,进而有效防控油茶炭疽病,该研究构建果生刺盘孢Crz1基因敲除突变体ΔCfcrz1和回补菌株ΔCfcrz1/Crz1,并测定突变体ΔCfcrz1、回补菌株ΔCfcrz1/Crz1和野生型菌株的生长发育、附着胞形成、外界胁迫应答、致病力以及对唑类杀菌剂的敏感性。结果显示,果生刺盘孢Crz1蛋白氨基酸序列与暹罗刺盘孢C.siamese的同源性最高,支持率高达100%;在马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)和基本培养基上,野生型菌株、回补菌株ΔCfcrz1/Crz1和突变体ΔCfcrz1的菌落直径分别为5.7、5.5、5.1 cm和5.3、5.1、2.8 cm,突变体ΔCfcrz1菌丝直径均极显著低于其他2株菌株;在含CaCl2和二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)的PDA培养基上,突变体ΔCfcrz1菌丝生长抑制率分别为100.0%和46.3%,极显著高于其他2株菌株;突变体ΔCfcrz1形成的分生孢子量和附着胞形成率分别为7.2×10~5个/mL和17.3%,极显著小于其他2株菌株;突变体ΔCfcrz1对油茶叶的致病力明显减弱,病斑直径仅为0.06 cm,极显著低于其他2株菌株;当抑霉唑浓度大于0.1μg/mL、苯醚甲环唑浓度大于0.5μg/mL、三唑酮浓度大于4μg/mL、戊唑醇浓度大于0.5μg/mL时,突变体ΔCfcrz1菌丝生长抑制率分别大于34%、80%、39%和22%,极显著高于野生型菌株和回补菌株ΔCfcrz1/Crz1。表明转录因子Crz 1参与调控油茶果生刺盘孢的生长、产孢、外界胁迫应答、致病力和对DMI类杀菌剂的抗性。

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