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马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B基因原核表达产物单抗的制备

作者：

韩凌霞;丁家波;陈雷;崔治中

单位：

山东农业大学动物科技学院;扬州大学畜牧兽医学院

关键词：

马立克氏病病毒;gB基因;间接免疫荧光试验;斑点酶联免疫吸附试验

摘要：

用大肠杆菌 BL2 1表达了马立克氏病病毒 ( MDV)强毒 GA株的囊膜糖蛋白 B( g B)基因 ,通过 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS- PAGE)分离表达蛋白条带 ,切下并碾碎后作为免疫原制备单克隆抗体。通过酶联免疫吸附试验 ( ELISA)和间接免疫荧光试验( IFA) ,得到 1株 GA株阳性的单克隆抗体杂交瘤细胞株 7C8。该单抗腹水的 ELISA效价为 1∶ 2 1 2 ,IFA效价为 1∶ 80 0 ,与 MDV不同致病型毒株 CVI988、GA、RB1 B、MD1 1、6 48A株感染的鸡胚成纤维细胞 ( CEF)均呈IFA阳性。 1∶ 1 0 0稀释时与 GA感染的 CEF在斑点酶联免疫吸附试验 ( dot- EL ISA)中呈阳性。

译名：

Preparation of Monoclonal Antibody of Marek's Disease Virus (MDV) Glycoprotein B Expressed in E.Coli

作者：

HAN Ling xia 1,DING Jia bo 1,CHEN Lei 1 ,CUI Zhi zhong 2 (1.Vet. Med. Coll.,Yangzhou University,Yangzhou,225009, China;2.Anim. Sci. and Tech. Coll.,Shandong Agri. University, Taian, 271018, China)

关键词：

marek's disease Virus (MDV); glycoprotein B gene (gB);indirect fluorescence assay(IFA); dot ELISA

摘要：

Glycoprotein B gene (gB) of virulent MDV GA strain expressed in E.coli was cut off from SDS PAGE ,then inoculated it to BALB/C mice directly to prepare monoclonal antibody. 1 strain of monoclonal hybridoma cells 7C8 was obtained by ELISA and Indirect Fluorescence Assay(IFA). Its ascites fluids titre of ELISA and IFA is 1: 212 and 1:800 respectively. The Mab can also identify CEF infected by MDV through dot ELISA.

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