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巴旦杏RAPD-PCR反应体系的正交优化

作  者:
孙晋科;罗淑萍;李疆;曾斌
单  位:
新疆农业大学生命科学系;新疆农业大学园艺学院
关键词:
巴旦杏;RAPD;正交设计
摘  要:
以巴旦杏DNA为模板,利用L25(56)正交设计,研究了dNTPs、DNA模板、Mg2+、Taq酶和随机引物5种RAPD反应组分浓度变化对扩增结果的影响。量化的分析结果表明,正交试验的方法可以较为准确地反映各个因素在不同水平上对RAPD-PCR的影响。试验研究建立的巴旦杏RAPD-PCR最佳反应体系为:25μLPCR反应体系中,10×TaqBuffer2.5μL,2.0mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,模板DNA为30 ng,随机引物0.8μmol/L,Taq聚合酶1.5 U。
译  名:
Optimization of Orthogonal Diagram of RAPD-PCR Reaction System in Amygdalus communis L.
作  者:
SUN Jing-ke1a,LUO Shu-pin1a,LI Jiang1b,ZENG Bin1b(a.Department of Life Sciences;b.College of Horticulture,1.Xinjiang Agricultural University,Urumqi 830052,China)
关键词:
Amygdalus communis L.;RAPD;orthogonal diagram
摘  要:
The L25(56) orthogonal diagram was applied to study the effects of different concentrations of dNTPs,DNA template,mg2+,Taq polymerase and random Primer on RAPD-PCR result of almond(Amygdalus communis L.) template.The quantitative analysis result showed that orthogonal diagram can be used to analyse the effects on RAPD-PCR accurately of each factor in different levels.The optimal RAPD-PCR reaction system for Amygdalus communis L.was determined as follows: 25 μL PCR reaction system contains 10 × buffer 2.5 μL,2.0 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTP,30 ng template DNA,0.8 μmol random primer and 1.5U Taq polymerase.

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