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环形泰勒虫SHERLOCK-LF检测方法的建立与初步应用

作  者:
苏书晓;赵帅阳;刘军龙;张楚晗;朱浩瀚;关贵全;殷宏;罗建勋
单  位:
中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室
关键词:
环形泰勒虫;RPA;Cas13a;crRNA;侧向流试纸条
摘  要:
为快速、准确、简便地对环形泰勒虫感染进行检测,选取环形泰勒虫子孢子表面抗原基因作为靶标分子,设计特异性RPA引物及crRNA(CRISPR RNA)序列,建立环形泰勒虫的特异性高灵敏酶报告基因解锁(specific high-sensitive enzymatic reporter unlocking,SHERLOCK)-LF检测方法,并分析该方法的特异性、敏感性和符合率。结果显示:该方法可特异性检测环形泰勒虫基因组,与中华泰勒虫、东方泰勒虫、牛巴贝斯虫和双芽巴贝斯虫基因组均无交叉反应,且检测灵敏度达到1.42 copies/μL;与行业标准PCR方法检测结果相比,其符合率达到86.96%。本研究建立的SHERLOCK-LF检测方法可在1.5 h内完成对环形泰勒虫的检测,为该病的现场诊断及防控提供了技术支撑。

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