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Position: Home > Articles > Full-length cDNA Cloning of Glycosyltransferase Family from Rhodiola sachalinensis FOOD SCIENCE 2010,31 (21) 244-247

高山红景天中糖基转移酶家族cDNA全长基因的克隆

作  者：
于寒松;张继星;李彦舫;马兰青;胡耀辉
单  位：
吉林农业大学食品科学与工程学院;农业部都市农业;内蒙古民族大学生命科学学院;吉林大学植物科学学院
关键词：
糖基转移酶;基因克隆;cDNA末端快速克隆法(RACE);高山红景天
摘  要：
为了获得高山红景天中红景天苷生物合成关键酶——UDP-糖基转移酶家族基因的全长cDNA序列,采用在线简并引物设计软件结合3′-RACE技术获得两个糖基转移酶基因的3′端部分序列,进一步采用不同的5′-RACE试剂盒扩增两个基因的5′端序列,结果显示利用Takara公司的试剂盒扩增可以得到cDNA全长序列(GenBank登录号为EF508689和EU567325),而采用Invitrogen公司的试剂盒得到的序列不包括全部开放读码框。实验证明,利用Takara公司的SMARTerTM RACE cDNA Amplification Kit克隆获得基因全长序列的比率更高。
译  名：
Full-length cDNA Cloning of Glycosyltransferase Family from Rhodiola sachalinensis
作  者：
YU Han-song1,ZHANG Ji-xing2,LI Yan-fang3,MA Lan-qing4,HU Yao-hui1,(1.College of Food Science and Engineering,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China ;2.College of Life Sciences,Inner Mongolia University for the Nationalities,Tongliao 028043,China ;3.College of Plant Science,Jilin University,Changchun 130062,China ;4.Key Laboratory of Urban Agriculture(North),Ministry of Agriculture,Beijing University of Agriculture,Beijing 102206,China)
关键词：
glycosyltransferase;gene cloning;rapid amplification of cDNA ends(RACE);Rhodiola sachalinensis
摘  要：
In order to obtain the critical enzyme for the synthesis of Rhodiola sachalinensis glycoside,two putative UDPglycosyltransferase(UGT) cDNAs(GenBank accession number,EF508689 和 EU567325) were isolated from R.sachalinensi.The primers were designed for 3 '-rapid amplification of cDNA ends(RACE) based on the consensus hybrid oligonucleotide primers(CODEHOP) strategy by the Block Maker program.A full-length cDNA sequence(Genbank accession numbers:EF508689 and EU567325) was obtained through the amplification using a SMARTerTM RACE cDNA Amplification Kit(TaKaRa,Dalian,China),whereas the sequence obtained using a 5'-RACE system(version 2.0,InvitrogenTM Life Technologies) contained no full-open reading frame.The cloning efficient of two 5'-RACE systems was investigated.Results exhibited that TaKaRa SMARTerTM RACE cDNA Amplification Kit was more efficient in complete cDNA sequence cloning,compared with the InvitrogenTM 5'-RACE system.

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