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Position: Home > Articles > The Eeffect of Mouse Cell Seeding Density on the Efficiency of iPS Cell Derivation Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis 2010,32 (5) 30-37

细胞接种密度对小鼠iPS细胞诱导效率的影响

作  者:
汪凌波;蒋婧;吕纹简;张璇;李劲松
单  位:
分子细胞生物学重点实验室;中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所
关键词:
体细胞重编程;胚胎干细胞;逆转录病毒;诱导多能干细胞
摘  要:
为研究小鼠胚胎成纤维细胞的接种密度对iPS(induced pluripotent stem,iPS)细胞诱导效率的影响,采用逆转录病毒载体法将Oct4,Sox2,Klf4,c-Myc4个基因或者Oct4,Sox2,Klf43个基因转入到携带有Oct4-EGFP转基因的小鼠胚胎成纤维细胞(Oct4-EGFP mouse embryonic fibroblasts,Oct4-EGFPMEF)中。感染病毒后的第4天将Oct4-EGFPMEF以500~128000个/孔(每孔面积9.6cm2)进行梯度铺盘,并分别于病毒感染后的第12天和第16天对4因子组和3因子组进行碱性磷酸酶染色和Oct4-EGFP阳性细胞比例检测。结果表明,Oct4-EGFPMEF感染病毒后的接种密度对于iPS细胞诱导效率存在较大的影响。4因子和3因子诱导产生iPS细胞的最佳接种密度分别为8000个/孔和32000个/孔。此外,通过逆转录病毒法,在最佳的接种密度下,可顺利地建立起iPS细胞系。
译  名:
The Eeffect of Mouse Cell Seeding Density on the Efficiency of iPS Cell Derivation

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