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针对单增李斯特菌iap基因PCR检测方法的建立及具应用

作  者:
崔小辉;贾艳艳;王伟杰;何圆圆;于会举;周吉培;蒋丹
单  位:
河南科技大学动物科技学院
关键词:
单增李斯特菌;英诺克李斯特菌;PCR方法;iap基因;临床应用;食品安全监督
摘  要:
为了建立快速、简便的单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes,LM)PCR检测方法,试验根据GenBank上已发表的单增李斯特菌iap基因序列,设计1对特异性引物,通过优化各种条件建立针对iap基因的单增李斯特菌的PCR检测方法,并对该方法的灵敏度和特异性进行评估及初步临床应用.结果表明:建立的PCR检测方法的最佳退火温度为60℃,Mix最佳使用量为12.5μL,模板使用量为30ng;该方法对单增李斯特菌纯培养物的检测限为1*105cfu/mL,且能够区分单增李斯特菌和英诺克李斯特菌,对沙门氏菌、大肠杆菌及猪链球菌均无交叉反应;对42份疑似感染单增李斯特菌临床样品进行PCR检测,有7份扩增结果呈阳性,与传统分离培养结果一致.说明试验所建立的PCR方法可用于食品中单增李斯特菌的检测.
译  名:
Establishment and application of the PCR method targeting the iap gene  for the detection of Listeria monocytogenes

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