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Position: Home > Articles > Condition optimization of real time PCR used in rapid detection of Penicillium expansum in apple juice concentrate Journal of Northwest A & F University(Natural Science Edition) 2007,35 (11) 84-89

浓缩苹果汁中扩展青霉菌实时PCR快速检测条件的优化

作  者:
樊明涛;毕静莹;刘邻渭;Mansel W Graffith
单  位:
Canadian;西北农林科技大学食品科学与工程学院
关键词:
苹果汁;扩展青霉;PCR检测
摘  要:
为了研究苹果汁生产中棒曲霉素产生菌的快速检测,利用实时PCR方法快速检测扩展青霉的可能性,对扩增条件进行优化。在polygatacturonase基因引物设计和传统PCR扩增扩展青霉DNA的基础上,研究实时PCR扩增时退火温度、引物浓度以及底物质量浓度对扩增效果的影响,以获得最佳的参数。结果表明,用Lightercy-cler实时PCR扩增扩展青霉DNA的最佳退火温度为61℃,最佳引物浓度为0.20~0.40μmol/L,底物质量浓度对实时PCR扩增的影响较小。在以上参数下,可以获得良好的PCR扩增曲线、产物溶解曲线以及清晰的产物条带。研究获得的快速检测扩展青霉的实时PCR参数,可用于浓缩苹果汁工业化生产中扩展青霉的快速检测,也可作为其他微生物实时PCR检测时的方法学参考。
译  名:
Condition optimization of real time PCR used in rapid detection of Penicillium expansum in apple juice concentrate

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