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鸭瘟病毒TK基因缺失转移表达载体的构建

作  者:
赵怀龙;凌红丽;蒋贻海;刘晓婧
单  位:
青岛蔚蓝生物股份有限公司
关键词:
鸭瘟病毒;TK基因;Cre/lox P;lac Z;转移载体
摘  要:
根据Gen Bank发表的鸭瘟病毒基因组序列设计1对引物,扩增出含完整TK基因及其上下游序列的长约2.0 kb片段。利用该片段5'端和3'端部分序列作为左右同源臂,其内构建有Pcmv-MCS-BGH pA及同向Psv40-lac Z-SV40 pA表达盒,同时在lacZ基因表达盒两侧设计有loxP序列,从而获得鸭瘟病毒TK基因缺失转移表达载体p DTK-lacZ。将p DTK-lacZ转染鸡胚成纤维(CEF)细胞,原位染色后镜下可见多处着染蓝色的细胞,结果表明本试验构建出适用于重组鸭瘟病毒制备平台的转移表达载体。

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