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ZEA和DON对原代小鼠T淋巴细胞代谢的影响

作  者:
史嘉缤;白玉妮;邹辉;顾建红;袁燕;刘学忠;刘宗平;卞建春
单  位:
扬州大学兽医学院
关键词:
玉米赤霉烯酮;脱氧雪腐镰刀菌烯醇;T淋巴细胞;代谢;糖酵解
摘  要:
为揭示玉米赤霉烯酮(ZEA)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的免疫毒性机制,试验分别研究了ZEA和DON对Anti-CD3+Anti-CD28刺激的小鼠离体T淋巴细胞代谢过程的影响.采用免疫磁珠负性分选法分离培养BALB/c小鼠原代T淋巴细胞,在CCK8法筛选ZEA和DON的染毒浓度基础上,试验分为4个组:空白对照组、Anti-CD3+Anti-CD28活化组、Anti-CD3+Anti-CD28+20 μmol/L ZEA 染毒组和 Anti-CD3+Anti-CD28+0.5 μmol/L DON染毒组.染毒48 h后,明场下观察细胞活化聚团现象;试剂盒检测LDH活性、NO和乳酸含量;qRT-PCR检测糖代谢关键酶PFKP、Pgam1和Gpi1的mRNA表达水平;Western-blot检测LDHA和c-Myc蛋白的表达情况.结果显示,与细胞空白对照组相比,活化组的细胞活率极显著升高(P<0.01),细胞发生明显聚团现象;LDH活性、NO和乳酸含量明显升高(P<0.05或P<0.01);糖代谢相关酶的mRNA表达显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);LDHA和c-Myc的表达也呈升高趋势(P<0.01).加入ZEA或DON作用48 h后,细胞发生明显分散,上述指标均显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01),提示T细胞代谢过程受到抑制.结果表明,ZEA、DON可通过抑制代谢关键基因和相关蛋白的表达来抑制T淋巴细胞的代谢过程,从而产生毒性作用.
译  名:
Effect of zearalenone or deoxynivalenol on the metabolism of primary T lymphocytes in mice

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