当前位置: 首页 > 文章 > 猪萨佩罗病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立 黑龙江畜牧兽医 2020 (19) 85-87,170
Position: Home > Articles > 猪萨佩罗病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立 Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine 2020 (19) 85-87,170

猪萨佩罗病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立

作  者:
王彩霞
单  位:
山东畜牧兽医职业学院
关键词:
猪萨佩罗病毒;实时荧光定量PCR;TaqMan探针;特异性;敏感性;重复性
摘  要:
为了建立一种猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus,PSV)TaqMan实时荧光定量PCR方法,试验根据GenBank中6株PSV的基因组序列设计合成特异性引物和探针,优化扩增体系和程序,并完成敏感性试验、特异性试验、重复性试验及PSV阳性样品的检测.结果表明:优化后的特异性引物和探针浓度均为0.8μmol/L、退火温度为55℃;建立的PSV TaqMan实时荧光定量PCR方法的最低检测限为5*10~1拷贝/μL,TaqMan实时荧光定量PCR方法的敏感性比普通PCR方法高100倍;仅以PSV阳性质粒为模板进行的TaqMan实时荧光定量PCR检测有扩增曲线,其他对照病毒样品均未发生扩增;组间与组内变异系数均低于1%;对30份阳性病料进行检测,扩增结果均为阳性.说明试验建立的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法敏感性、特异性、重复性好,可用于PSV的临床检测.

相似文章

计量
文章访问数: 7
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊