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Position: Home > Articles > Molecular cloning of AGRP and NPY and their expression analysis during fasting and refeeding in juvenile blunt snout bream (Megalobrama amblycephala) Journal of Fisheries of China 2020,44 (11) 1777-1791

团头鲂AGRP和NPY基因cDNA克隆及其在饥饿与再摄食状态下的表达分析

作  者:
孙盛明;苏艳莉;潘方艳;戈贤平
单  位:
上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室;南京农业大学无锡渔业学院
关键词:
团头鲂;刺鼠相关蛋白;神经肽Y;饥饿;基因表达
摘  要:
为研究刺鼠相关蛋白(AGRP)和神经肽Y(NPY)在团头鲂幼鱼应答饥饿与再摄食过程中所起的调控作用,本研究采用RACE PCR技术首次克隆了团头鲂AGRP和NPY基因全长cDNA序列,通过设置正常对照组(control,体质量3% 持续投喂4周)、饥饿再投喂组(F/refeeding,饥饿2周+3% 再投喂2周)、饥饿过量投喂组(F/excessive refeeding,饥饿2周+8% 再投喂2周)和饥饿组(fasted,持续饥饿4周)4个处理组,采用qRT-PCR技术分析团头鲂在脑和肠道组织中这2种基因在饥饿再投喂过程中的表达变化特征.结果显示:①组织学分析表明,持续饥饿组肠道黏膜下层出现明显的白细胞浸润现象.②团头鲂AGRP和NPY基因cDNA序列全长分别为770和557 bp,其中有5'非编码区77和101 bp以及3'非编码区315和120 bp,开放阅读框为378和336 bp,共编码了125个氨基酸和111个氨基酸.系统进化树分析表明,团头鲂的AGRP和NPY分别与其他鲤科鱼类聚为一支,具有最近的亲缘关系.③qRT-PCR分析显示,AGRP和NPY基因在所有检测组织中均有表达,二者均在脑组织中表达量最高,其次是肝脏和肠道.④饥饿再投喂处理对团头鲂脑和肠道中AGRP和NPY基因表达影响显著,饥饿组团头鲂脑和肠道组织AGRP基因表达量均呈先升后降趋势,第28天,饥饿再投喂组能够显著上调团头鲂AGRP基因在脑组织中的表达,但饥饿过量投喂组能够显著上调AGRP基因在肠道中的表达量.持续饥饿组团头鲂脑和肠道组织NPY基因表达呈先上升后下降趋势,且饥饿组脑和肠道组织中NPY表达量在28 d均显著高于其余3组.研究表明,AGRP和NPY基因在团头鲂摄食调控中发挥重要作用,且在脑和肠道组织中具有不同表达模式.
译  名:
Molecular cloning of AGRP and NPY and their expression analysis during fasting and refeeding in juvenile blunt snout bream (Megalobrama amblycephala)

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