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当前位置: 首页 > 文章 > 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E_2基因重组卡介苗的构建 中国兽医杂志 2014 (7) 32-35
Position: Home > Articles > Construction of Recombinant BCG for BVDV E2 gene Chinese Journal of Veterinary Medicine 2014 (7) 32-35

牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E_2基因重组卡介苗的构建

作  者：
时坤;王文玉;王慧慧;曾范利;李健明;杜锐
单  位：
教育部动物生产及产品质量安全重点实验室;吉林农业大学研究生学院;吉林农业大学动物科学技术学院;长春西诺生物科技有限公司;吉林农业大学中药材学院
关键词：
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒;E2基因;重组卡介苗,构建
摘  要：
本试验将成功克隆的牛病毒性腹泻-黏膜病病毒Changchun184株E2基因与大肠杆菌-分枝杆菌整合表达载体pMV361连接,构建重组整合质粒pMV361-E2。并确定了电转化的最佳条件:2.0 kV/cm、25μF、1 000Ω,成功获得了E2基因重组卡介苗。在45℃下热诱导E2基因在重组卡介苗中的表达,通过SDS-PAGE电泳和免疫印迹检测,结果显示,在44 kD处出现目的条带,符合E2基因表达蛋白的大小,表明牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因在卡介苗中成功表达。
译  名：
Construction of Recombinant BCG for BVDV E2 gene
作  者：
SHI Kun;WANG Wen-yu;WANG Hui-hui;ZENG Fan-li;LI Jian-ming;Du Rui;College of Chinese Medicine Materials,Jilin Agricultural University;College of Animal Science &Technology,Jilin Agricultural University;Changchun SR Biological Co.Ltd;College of Graduate,Jilin Agricultural University,Key Laboratory of Animal Production,Product Quality and Security,Ministry of Education of the people's Republic of China;
关键词：
Bovine viral diarrhea virus(BVDV);;E2 gene;;recombinant BCG;;construction
摘  要：
E2 gene of BVDV Changchun 184 strain was cloned and inserted into the integration expression plasmid vector p MV361,and the recombinant integration plasmid p MV361-E2 was constructed.Then p MV361- E2 was transformed into BCG successfully and recombinant BCG resistive to kanamycin was obtained. After studying the main factors which can effect the result of electroporation,the optimal electroporation parameters were confirmed,which are 2.0 kv/cm,25 μF,and 1 000 Ω.The resulting plasmids p MV361-E2 was electrotransfected into BCG that it was induced at 45 ℃,and then the SDS-PAGE and western blotting were used to analyze the expression product. Our results showed that the vector p MV361 containing E2 gene was successfully constructed,and Western blotting indicated that the E2 gene was successfully expressed in rBCG.

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