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牛病毒性腹泻-黏膜病病毒斑点酶联免疫吸附检测法的建立

作  者:
张宁;赵月兰;赵博伟;胡晓悦;吕炳起;刘军峰
单  位:
河北省畜牧兽医研究所;河北省畜牧兽医局;河北农业大学;河北省动物疫病预防控制中心
关键词:
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒;斑点酶联免疫吸附法;检测
摘  要:
采用辛酸-硫酸铵法提取兔抗BVDV高免血清中的免疫球蛋白IgG,在混合硝酸纤维素膜上进行间接酶联免疫吸附试验,建立了检测BVDV抗原的斑点酶联免疫吸附检测法。结果显示,抗体最佳包被量为400μg/mL,酶标记羊抗兔IgG的最佳工作浓度是1:500倍稀释,抗原最小检出量是5.36μg/mL。应用建立的检测方法对78份腹泻奶牛血样进行了检测,阳性检出率为58.97;经卡方(χ2)检验分析,建立的间接Dot-ELISA与AGP法相比较,阳性检出率差异显著。证实该方法敏感性高、简便快速,适合于基层兽医的检测诊断。

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