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布鲁氏菌、弓形虫及巴尔通体多重TaqMan荧光PCR检测方法的建立及应用

作  者:
赵冉;蔡振鸿;陈琼;徐晔;陈永锋;连玉华;李谓娟;温亚萍;吕菊香
单  位:
关键词:
多重荧光PCR;布鲁氏菌;弓形虫;巴尔通体;检测
摘  要:
为建立一种应用于宠物布鲁氏菌、弓形虫及巴尔通体的高通量、高灵敏、高特异的检测方法,根据各自保守序列合成了特异性引物及TaqMan探针,通过优化反应体系,建立了多重TaqMan荧光PCR检测方法,并利用该方法对2021年厦门市抽检的304份犬猫全血样品进行了检测.结果显示:该方法特异性好,可特异性扩增布鲁氏菌、弓形虫和巴尔通体阳性核酸,其他对照菌株核酸均无扩增信号;抗干扰性强,检测混合模板时,不同成分间无交叉干扰反应;灵敏度高,最低检出限均为3×100 copies/μL;重复性好,批内及批间重复试验变异系数均小于2%.应用该方法在4 h内即可完成304份临床样品的快速检测,此次临床抽检样品中未检出布鲁氏菌、弓形虫及巴尔通体阳性核酸.该方法大大提高了检测效率,为多种动物布鲁氏菌、弓形虫及巴尔通体感染的早期诊断及筛查提供了技术支持.
译  名:
Establishment and Application of Multiplex TaqMan Real-time PCR for Brucella,Toxoplasma gondii and Bartonella

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