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非洲猪瘟病毒p30基因纳米PCR检测方法的建立

作  者:
魏宇;王海璐;孙飞雁;王楠;孙亮;程悦宁;郭利
单  位:
吉林省动物疫病预防控制中心;中国农业科学院特产研究所农业农村部经济动物疫病重点实验室
关键词:
非洲猪瘟病毒;p30基因;纳米PCR检测技术;早期检测
摘  要:
为了建立准确、敏感的早期快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的分子生物学方法,根据ASFV中p30蛋白在感染机体中早期表达的特点,设计出1对ASFV中p30基因保守序列的特异性引物,应用纳米PCR建立一种适用于早期检测ASFV的方法,并对其敏感性、特异性和临床样品检测进行研究和分析.结果显示:该纳米PCR的最低检出限为2.47×103 copies/μL,而普通PCR的最低检出限为2.47×104 copies/μL,表明纳米PCR的敏感性是普通PCR的10倍;同时,与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒均未发生交叉反应.此外,分别应用所建立的ASFV p30基因纳米PCR和普通PCR对18份临床样品进行检测,纳米PCR的阳性率为33.33%,普通PCR的阳性率为22.22%.上述结果表明,建立的纳米PCR检测方法可以对早期感染ASFV的病猪进行快速临床检测,具有良好的敏感性和特异性,为非洲猪瘟的诊断和防控提供了 一定的技术保障.
译  名:
Establishment of detection method of African swine fever virus p30 gene by nano-PCR

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