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Position: Home > Articles > Preliminary Investigation on the Biosynthesis of Recombinant Peanut Allergen Ara h2 FOOD SCIENCE 2010,31 (15) 203-207

重组花生过敏原Ara h2的生物合成

作  者:
胡纯秋;高金燕;罗春萍;陈红兵;朱盼
单  位:
南昌大学
关键词:
食物过敏;花生过敏原Ara h2;生物合成
摘  要:
为获得重组花生过敏原Ara h2。通过RT-PCR合成cDNA,并以此为模板进行PCR扩增目的基因Ara h2,扩增产物经纯化后克隆至pMD19-TSimple载体中,构建重组质粒pMD19-T-Ara h2。上述重组质粒经酶切纯化后定向克隆到pGEX-4T-1表达载体中,构建原核表达载体pGEX-4T-1-Ara h2,并转化表达宿主菌BL21-codonPlus(DE3)-RIPL中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳结果表明,该表达蛋白大小约为46kD,与理论值相符。通过Glutathione Sepharose 4B凝胶亲和层析方法纯化融合蛋白GST-Ara h2,获得融合蛋白纯度约为90%。Western blotting分析表明,经纯化的融合蛋白能与抗Ara h2兔血清发生特异性反应,说明该蛋白具有良好的免疫原性。
译  名:
Preliminary Investigation on the Biosynthesis of Recombinant Peanut Allergen Ara h2

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