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猪A群轮状病毒和C群轮状病毒以及猪星状病毒多重RT-PCR同时检测方法的建立及应用

作  者:
杨文宇;周远成;韩燕;陈蕾;廖春燕
单  位:
四川农业大学动物医学院;四川农业大学动物生物技术中心四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室;四川农业大学动物生物技术中心动物疫病与人类健康四川省重点实验室;西南大学荣昌校区
关键词:
猪A群轮状病毒;猪C群轮状病毒;猪星状病毒;多重RT-PCR
摘  要:
为建立同时快速检测猪A群轮状病毒(GARV)、猪C群轮状病毒(GCRV)和猪星状病毒(AstV)的三重RT-PCR检测方法,根据GenBank中公布的序列进行病毒基因区同源性分析,然后使用Primer Premier 5.0软件分别设计了GARV、GCRV的VP6基因和AstV的ORF2基因特异性引物,预期扩增片段的大小分别为229、166和410bp。在这3种病毒单项RT-PCR技术的基础上,建立了GARV、GCRV和AstV的多重RT-PCR检测方法,并用该方法检测30份四川省仔猪腹泻粪样。结果显示,GARV、GCRV、AstV的阳性检出率分别为26.7%、13.3%、16.7%,本方法与这3种病毒的单项RT-PCR检测结果的符合率分别为100%、100%、83%,整体符合率达94.3%,特异性为100%。结果表明,本试验建立的多重RTPCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可用于GARV、GCRV和AstV的同时检测。
译  名:
Establishment and clinical application of a multiplex reverse transcription-PCR for simultaneous detection of porcine group A rotavirus,porcine group C rotavirus and porcine astrovirus

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