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当前位置: 首页 > 文章 > A亚群禽白血病病毒env基因在昆虫细胞中的表达与鉴定 江苏农业学报 2017 (6) 1316-1320
Position: Home > Articles > Expression and identification of subgroup A avian leukosis virusenv in insect cell Jiangsu Journal of Agricultural Sciences 2017 (6) 1316-1320

A亚群禽白血病病毒env基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

作  者：
梅梅;胡晓田;秦爱建;陆吉虎;张雪花;侯继波;唐应华
单  位：
江苏省农业科学院动物免疫工程研究所;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室
关键词：
A亚群禽白血病病毒;env基因;表达
摘  要：
为获得A亚群禽白血病病毒(ALV-A)env基因的表达产物,以ALV-A AH10毒株病毒RNA为模板,通过反转录PCR扩增得到env基因,将其克隆到转移载体p Fast Bac1中,转化DH10Bac感受态细胞,获得重组穿梭质粒r Bacmid-env A,r Bacmid-env A转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒。间接免疫荧光试验(IFA)和免疫印迹试验(Western-blot)结果显示,重组蛋白可与抗ALV-A抗体发生特异性反应,重组蛋白分子大小约为90 000,与预期大小相符,表明env基因在Sf9细胞中获得了良好表达。
译  名：
Expression and identification of subgroup A avian leukosis virusenv in insect cell
作  者：
MEI Mei;HU Xiao-tian;QIN Ai-jian;LU Ji-hu;ZHANG Xue-hua;HOU Ji-bo;TANG Ying-hua;Institute of Veterinary Immunology and Engineering,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences;Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses;Key lab of Jiangsu Preventive Veterinary Medicine,Yangzhou University;
关键词：
avian leukosis virus subgroup A(ALV-A);;env gene;;expression
摘  要：
To abtain the expression product of subgroup A avian leukosis virus env gene,the env gene amplified from subgroup A avian leukosis virus strain AH10 was cloned into transfer vector p Fast Bac1 and cloned into the shuttle vector Bacmid by transferred into DH10 Bac competent cell. The recombinant shuttle plasmid r Bacmid-env A was then transfected into Sf9 cells to generate recombinant virus. The results of indirect immunofluorescence assay(IFA) and western blot showed that the recombinant protein could be recognized specifically by the polyclonal antibody against ALV-A with the molecule weight about 90 000,which was consistent with the expected,and all the results indicated that the env gene was expressed well in Sf9 cells.

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