虾夷扇贝Dmrt1基因的分子鉴定及表达模式分析
- 摘 要：
- Dmrt1是Dmrt双性和mab-3相关转录因子基因家族的重要成员之一,在生殖细胞分化和性别调控中发挥着重要作用。为探究其在虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis）性别分化中的表达调控模式,本研究利用生物信息学的方法分析了虾夷扇贝Dmrt1的序列特征;采用半定量PCR （RT-PCR）检测了Dmrt1在不同组织中的表达量差异;应用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）和原位杂交技术ISH （in situ hybridization）揭示了Dmrt1在性腺发育4个时期（增殖期、生长期、成熟期、排放期）中的时空表达变化。结果显示,虾夷扇贝Dmrt1序列包含Dmrt基因家族共有的DM结构域;与已知物种同源序列比对后发现,虾夷扇贝Dmrt1序列与欧洲大扇贝（Pecten maximus）同源性最高;原位杂交检测到的阳性信号主要定位在生殖细胞的细胞质中; qRT-PCR定量结果发现, Dmrt1在精巢生长期和成熟期的表达水平显著高于卵巢,在卵巢各发育时期中的表达量无明显变化且维持低水平状态。此外,在外套膜、鳃、肾、和闭壳肌中检测到少量表达的Dmrt1转录本,而在肝胰腺中未检测到。研究结果表明, Dmrt1在虾夷扇贝生殖细胞分化过程中的表达特征与在其他动物性腺发育中的表达特征基本一致,推测其是虾夷扇贝性别分化调控中的关键基因。
关键词：虾夷扇贝;Dmrt1;荧光定量PCR;原位杂交;性别分化;
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