Foxl2基因在虾夷扇贝发育过程中的表达模式分析
中国水产科学研究院长岛增殖实验站;中国水产科学研究院黄海水产研究所;上海海洋大学
- 摘 要：
- Foxl2是叉头状转录因子(forkhead transcription factor,Fox)基因家族的重要成员之一,在卵巢发育和性别调控中发挥着重要作用.为探究Foxl2在虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)性腺发育中的表达调控模式,利用生物信息学方法分析了虾夷扇贝Foxl2的序列特征;采用半定量PCR(RT-PCR)检测了Foxl2在不同组织中的表达差异.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和原位杂交技术(ISH)揭示了 Foxl2在性腺发育4个时期(增殖期、生长期、成熟期和排放期)的时空表达变化.结果显示,虾夷扇贝Foxl2序列包含Fox基因家族共有的FH结构域;多重序列比较分析显示,虾夷扇贝与栉孔扇贝(Chlamys farreri)、欧洲大扇贝(Pecten maximus)的相似性最高,分别为98%、96%.系统进化树分析显示,在不同物种以及进化的过程中,Foxl2基因具有较高的保守性.定量分析和原位杂交结果显示,原位杂交阳性信号主要定位在生殖细胞的细胞质中.在虾夷扇贝的鳃、肾、肝胰腺、精巢中,都可检测到少量Foxl2转录本的存在,在卵巢中表达量最高,且在卵巢成熟期达到最高值.随着性腺发育和精细胞的逐级分化,Foxl2的表达量呈下降趋势,这与原位杂交的结果一致.研究表明,Foxl2在虾夷扇贝卵巢发育中可能发挥重要作用,推测其是雌性虾夷扇贝性腺发育调控中的关键基因,可为今后阐明其在虾夷扇贝性别分化进程中的功能提供理论依据.
关键词：虾夷扇贝;Foxl2;荧光定量PCR;原位杂交;性腺发育
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