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非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体的制备与应用

作  者:
郝丽影;王彦伟;孙玉洁;曹红梅;黄甜;逄文强;李向东;邓均华;田克恭
单  位:
洛阳普泰生物技术有限公司;国家兽用药品工程技术研究中心
关键词:
非洲猪瘟病毒;P30蛋白;大肠杆菌表达系统;单克隆抗体;胶体金免疫层析法
摘  要:
为研发非洲猪瘟病毒(ASFV)的免疫学诊断试剂,利用大肠杆菌表达系统表达重组ASFV P30蛋白,制备并鉴定P30蛋白单克隆抗体,建立检测ASFV的胶体金免疫层析法(GICA).结果显示,成功构建了重组表达质粒pET28a-P30,实现了重组P30蛋白的可溶性表达,且该重组蛋白与ASFV阳性血清可发生特异性反应;制备了10株稳定分泌P30蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水ELISA效价均高于1∶40 000,与ASFV具有良好的反应性,且不与其他常见猪源病毒反应;利用2株单克隆抗体建立胶体金免疫层析法,可用于ASFV的检测.

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