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1株产酸性α-淀粉酶黑曲霉原生质体制备和再生条件优化

作者：

王发祥;俞健;王建辉;李向红;何纪华;刘永乐

单位：

长沙理工大学化学与生物工程学院

关键词：

原生质体;酸性α-淀粉酶;黑曲霉;响应面法;制备;再生

摘要：

通过单因素试验、Plackett-Burman(PB)试验和响应面优化获得产酸性α-淀粉酶黑曲霉孢子原生质体制备和再生的最佳工艺参数:黑曲霉种龄72 h、孢子浓度7.5×106CFU/mL、渗透压稳定剂甘露醇浓度0.85 mol/L,以10 g/L蜗牛酶+10 g/L纤维素酶+10 g/L溶菌酶为破壁酶、pH 6.8、酶解温度37℃、酶解2 h。在此条件下,原生质体制备率可达86.92%,再生率可达42.67%。

译名：

Optimization of Protoplast Formation and Regeneration from an Aspergilli niger Strain Producing Acid-Stable α-Amylase

作者：

WANG Fa-xiang;YU Jian;WANG Jian-hui;LI Xiang-hong;HE Ji-hua;LIU Yong-le;College of Chemistry and Biological Engineering,Changsha University of Science and Technology;

关键词：

protoplast;;acid-stable α-amylase;;Aspergilli niger;;response surface methodology;;formation;;regeneration

摘要：

The optimum conditions for formation and regeneration of protoplasts from Asperigillus niger with a high yield of acidstable α-amylase we re obtained using one-factor-at-a-time experiments, Plackett-Burman design and response surface methodology as follows: seed age of 72 h, spore concentration of 7.5 × 106 CFU/mL, stabilization of the osmotic pressure using 0.85 mol/L mannitol, and hydrolysis of cell walls with a mixture of snailase(10 g/L), cellulose(10 g/L) and lysozyme(10 g/L) at 37 ℃, pH 6.8 for 2 h. Under these conditions, the rates of protoplast formation and regeneration reached 86.92% and 42.67%, respectively.

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