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Position: Home > Articles > Construction of recombinant eukaryotic expression plasmid of growth hormone in Ningxiang pigs(pCI-GH-EGFP) and its expression in Vero cells Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine 2016 (13) 86-89+277

重组宁乡猪生长激素真核表达质粒(pCI-GH-EGFP)的构建及其在Vero细胞中的表达

作  者:
王文策;翟双双;耿梅梅;褚武英;魏永伟
单  位:
浙江大学动物预防医学研究所浙江省重点实验室;华南农业大学动物科学学院;长沙学院生物工程与环境科学系
关键词:
宁乡猪;生长激素(GH)基因;增强型绿色荧光蛋白(EGFP);克隆;真核表达
摘  要:
为了构建宁乡猪生长激素(GH)真核表达系统,并转染非洲绿猴肾细胞系(Vero)观察其表达情况,试验选用宁乡猪脑垂体组织总RNA反转录获得的c DNA为模板,克隆宁乡猪生长激素(nxGH)基因序列,将其定向插入p CI载体构建重组质粒p CI-GH,并将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因酶切后连入质粒p CI-GH中,构建真核表达载体p CI-GH-EGFP。将该重组质粒在脂质体作用下转染Vero细胞,倒置荧光显微镜下观察到GH-EGFP融合蛋白可稳定表达。结果表明:宁乡猪生长激素基因编码区序列含有1个由651个核苷酸组成的开放阅读框(ORF),编码216个氨基酸残基。
译  名:
Construction of recombinant eukaryotic expression plasmid of growth hormone in Ningxiang pigs(pCI-GH-EGFP) and its expression in Vero cells

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